難溶藥物A水包油納米乳制備工藝實現緩釋和靶向給藥

納米乳作為一種新型的給藥遞送系統,其制備工藝簡單,制劑質量穩定,具有一定的動力學和熱力學穩定性,且所載藥物經乳液包裹后一方面能其有效提高藥物的穩定性,另一方面也能降低給藥的刺激性?納米乳可以增加難溶性藥物的溶解度,并且能實現同時對脂溶性藥物和水溶性藥物的增溶,尤其適用于成分復雜的中藥提取物復方制劑的開發?此外,納米乳作為經皮給藥制劑的給藥載體,由于其粒徑小的特點,能增強藥物活性成分的經皮擴散速率,吸收明顯加快?

本研究將簡介一種油水均難溶性物質,通過納米乳包裹形式增加載藥量,實現緩釋和靶向給藥的目的?

主要儀器:

Agilent1100型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);

NanoZS90型激光粒度散射儀和Zeta電位儀(英國馬爾文公司);

WST-NANO (微斯特科技(蘇州)有限公司

實驗方法與結果:

難溶藥物A納米乳的處方優選采用單因素考察法,以乳劑的外觀?性狀?穩定性和載藥能力等為指標對難溶藥物A納米乳的處方進行優化? 

1. 注射用油的選擇

經調研,難溶藥物A在大豆油中的溶解度較高,大豆油與其他表面活性劑的配伍可進一步增難溶藥物A的溶解度?《中國藥典》2005版中已收載了注射用大豆油的質量標準,從安全性和實用性角度考慮,選擇注射用大豆油作為難溶藥物A水包油納米乳的油相?本實驗采用常用的脂肪乳的處方對大豆油的用量進行考察:注射用油,甘油2.25%,磷脂1.2%,泊洛沙姆2.0%?固定其他處方組成,以不同用量的大豆油制備乳劑進行考察?結果表明,在一定范圍內,隨著注射用油用量的增加,乳劑穩定性隨之降低.當乳劑中油相低于5%時,較難形成均勻的分散體系?當乳劑油相用量高于30%時,乳劑粘度較大,不適于靜脈注射?因此本研究選擇乳劑中注射用大豆油的用量范圍為5~20%?

2. 乳化劑的選擇

目前靜脈注射乳劑較為常用的乳化劑有磷脂和泊洛沙姆,具有安全性好,乳化能力強的優點.至今為止,以這兩種乳化劑制備得到的乳劑靜脈注射給藥后未發現有毒性和副作用的產生.本研究分別對處方中單用F68和磷脂以及二者合用的乳劑進行比較,結果表明處方中F68和磷脂合用可大大增強乳化效率?以大豆磷脂和卵磷脂制成的乳劑中前者的穩定性更好,因此本研究采用大豆磷脂和F68為復合乳化劑制備納米乳,考慮到乳劑的安全性和穩定性,本研究中大豆磷脂的用量不高于2%,F68的用量范圍在0.5~2%之間?

3. 輔助乳化劑的選擇

本研究對常用的油酸和膽固醇進行考察,結果表明,在乳劑中加入少量的油酸對乳劑的穩定性影響不大,而增加油酸的用量反而引起乳劑的不穩定?加入適量膽固醇后可改善乳劑的穩定性,因此本研究以膽固醇與乳化劑合用制備乳劑,磷脂與膽固醇的比例在10:1~4:l之間?

4. 穩定劑的選擇

考察4種生物相容性好的脂肪酸或脂肪酸酯作為穩定劑對難溶藥物A水包油納米乳的影響,分別記為穩定劑A?穩定劑B?穩定劑C和穩定劑D?考察了制備的難易程度?載藥量和穩定性?結果表明,穩定劑A和穩定劑B的熔點較高(~65℃),制備中對溫度的要求較為苛刻?且難溶藥物A在高于60"C的條件下易于分解失活,因此不適宜制備難溶藥物A水包油納米乳劑?穩定劑C和穩定劑D具有適宜的熔點(~55°C),易于制備?二者的載藥能力相似,但長期放置后以穩定劑D制成的乳劑難溶藥物A較易析出?這可能是因為穩定劑D可以水解生成不同的次級脂肪酸酯和游離脂肪酸等,從而體系中出現了許多化學性質不一的物質,影響制劑的穩定性?藥物穩定劑的量對乳劑的穩定性也有影響,穩定劑用量較低,制劑載藥量增加不明顯?用量過多會引起乳劑的分層和藥物的析出?本研究采用穩定劑c作為藥物穩定劑,在處方中穩定劑C:大豆油的比例在l:25~l:100范圍內均可制成穩定的水包油納米乳劑?

5. 難溶藥物A水包油納米乳制備工藝的優化

以不同方法對上述處方的難溶藥物A水包油納米乳劑進行制備,結果表明,超聲法制備乳劑,小量時乳滴粒徑分布較均勻,但粒徑偏大,乳劑不穩定，不同處理量情況，處理結果差異較大;磁力攪拌法得到的乳劑粒徑分布范圍較大，穩定性很差;微通道乳化技術是一種新型的乳劑制備技術,本研究將油相裝入注射器中注入到水相當中,模擬微通道乳化技術同時結合渦旋混合的方法來制備初乳?高壓均質和微射流高壓乳勻法處理的乳劑均能達到較小的粒徑,但微射流均質法制備的樣品pdi更小，長期放置結果表明,微射流高壓乳勻法制備得到的乳劑更為穩定,因此本研究采用微孔注入法與渦旋混合的方式將油相加入水相中,經過高速分散后以微射流高壓乳勻制備難溶藥物A水包油乳劑?

工藝參數優化結果表明,在制備過程中,渦旋混合時間不應少于2min?考慮到難溶藥物A的自身性質,乳化溫度不應高于60°C.高速分散使用8000-12000rpm均可得到穩定的初乳,轉速過高容易造成初乳泡沫過多,處理時間在1.3min為宜.微射流高壓均質采用先低壓處理再高壓處理的方式易得到穩定的制劑?本法采用低壓(5000psi)2個循環后高壓(10000psi)處理6個循環得到的乳劑粒徑小于200nm,分布范圍較窄,符合靜脈注射要求?

制備結果：制得的納米乳外觀為乳白色?無油花?玻璃瓶中無掛壁現象;用2.25%甘油水溶液適當稀釋后,難溶藥物A水包油納米乳有藍色乳光出現?取難溶藥物A納米乳3批,每批取樣3份,置于10mL離心管中,4000rpm離心'30min?結果未見分層現象?

難溶藥物A水包油納米乳粒徑測試結果報告

以注射用大豆油?大豆磷脂?膽固醇和穩定劑C為油相,Poloxamerl88?甘油為水相,采用微射流技術制備難溶藥物A水包油納米乳?粒徑為152+_18nm(PDl0.078+_0.018),zeta電位為-33.28+2.07mV?pH值在7.18+_0.03之間,符合注射要求?難溶藥物A水包油納米乳劑藥物含量為2.98+_0.03mg/mL?